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Scheren von gDNA kann die PCR verbessern
Eine DNA-Präparation aus intakten Zellen (Blut/Zellkultur/Gewebe) führt meist zu langer gDNA (>150 kbp) das war perfekt für die alten Zeiten mit Southern-Blot und Hybridisierung, aber für PCR ist...
7 Feb., 2020
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Chloroform tropft beim pipettieren
Bekanntlich tropft es beim Pipettieren von Chloroform und anderen Flüssigkeiten mit .... ja richtig einem hohen Dampfdruck. Die Lösung ist, pipettieren Sie 4 bis 5 mal in der Chloroformlösung auf...
7 Feb., 2020
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Dimere und SYBR-Green & Eva-Green im real-time PCR Assay
Dimere entstehen durch Annealing von Primern an Primern und Amplifikation zu einem Primer-Dimer. Die Stabilität der Primer-Primer-Bindung hängt von der Temperatur (Annealing), Basenzusammensetzung...
7 Feb., 2020
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"Als man noch mit dem Mund pipettiert hat"
Mein Doktorvater hatte Restriktionsenzyme immer mit einer Glaskapillare und einem kleinen Gummischläuchchen pipettiert, so konnte er auch geringe Volumina genau pipettieren, besonders wenn die...
7 Feb., 2020
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Ligationen in Glaskapillaren
Bei Ligationen (vor den Kit-Zeiten) hat man versucht die Konzentration der DNA zu erhöhen, indem man in einem sehr kleinen Volumen gearbeitet hat. Um zu verhindern, dass zuviel Flüssigkeit...
7 Feb., 2020
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DNA-Präparation aus Spurenträgern
Als wir noch Spurenanalysen machten ... hatten wir oftmals sehr dreckige Spurenträger mit allerhand Dreck und Staubpartikel. Um die Probe dennoch sauber zu bekommen, haben wir zunächst lysiert,...
7 Feb., 2020
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Sequenzier-Gel sparen ....
Lineares Polyacrylamid für die Kapillar-Gelelekrophorese ist einer der teuersten Komponenten beim Sequenzieren. Schön wäre es doch, wenn man die Gelreste, die die Maschine nicht mehr nutzen kann...
7 Feb., 2020
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Primer-Design ohne SNPs unter Primern
Bei den Primer3Plus Einstellungen (Advanced Setting) gibt es die Möglichkeit, dass das Programm Ns ignorieren, oder akzeptieren soll. Damit können sie ausschließen, dass Primer über SNPs...
7 Feb., 2020
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